巨噬細(xì)胞清除劑的脂質(zhì)體Liposomes常見制備方法

耗竭清除巨噬細(xì)胞（Depletion of macrophages）是研究巨噬細(xì)胞功能的重要方法。荷蘭阿姆斯特丹Vrije University 的Nico van Rooijen教授開發(fā)的一款Clodronate Liposomes，貨號(hào)：CP-005-005，可以利用巨噬細(xì)胞的內(nèi)吞機(jī)制，將膜不通透性的氯磷酸二鈉（Clodronate）帶入細(xì)胞內(nèi)，氯磷酸二鈉被釋放，當(dāng)達(dá)到一定的濃度時(shí)可引發(fā)巨噬細(xì)胞的凋亡，從而達(dá)到去除巨噬細(xì)胞的目的。配合PBS脂質(zhì)體用于對(duì)照組實(shí)驗(yàn)，以了解巨噬細(xì)胞的消耗是否歸因于注射氯磷酸二鈉脂質(zhì)體后產(chǎn)生的效果。

脂質(zhì)體Liposomes是由一層或多層的磷脂分子構(gòu)成的微小囊泡，被廣泛應(yīng)用于藥物傳遞、基因轉(zhuǎn)移、生物傳感、成像檢測(cè)等領(lǐng)域。

靶點(diǎn)科技介紹脂質(zhì)體的常見制備方法。

1. 脂質(zhì)體的基礎(chǔ)結(jié)構(gòu)

在制備脂質(zhì)體之前，需要了解脂質(zhì)體的基礎(chǔ)結(jié)構(gòu)，以更好地理解它們的制備過程。脂質(zhì)體由一個(gè)或多個(gè)磷脂分子和一個(gè)或多個(gè)膽固醇分子，以及其他輔助物質(zhì)（如表面活性劑、離子、蛋白質(zhì)等）構(gòu)成。在生物體系中，脂質(zhì)體是細(xì)胞膜的重要組成部分，對(duì)于維持細(xì)胞內(nèi)外環(huán)境平衡、物質(zhì)傳遞等具有重要作用。

2. 制備脂質(zhì)體的基本步驟

制備脂質(zhì)體的基本步驟包括：

（1）選取適當(dāng)配比的磷脂分子和膽固醇分子，并將它們混合在一起；

（2）加入脂質(zhì)體所需的其他輔助物質(zhì)，如表面活性劑、離子、蛋白質(zhì)等，以便改進(jìn)脂質(zhì)體的性質(zhì)；

（3）用適當(dāng)?shù)姆椒▽⒒旌衔锓稚⒊晌⑿〉哪遗荩蛊湫纬芍|(zhì)體。

靶點(diǎn)科技將分別介紹每個(gè)步驟的常用方法。

3. 選取磷脂和膽固醇

所選擇的磷脂和膽固醇組合對(duì)脂質(zhì)體的特性和功能有很大的影響。常用的磷脂包括卵磷脂、磷脂酰肌醇、羥基磷脂、磷脂酰絲氨酸等。卵磷脂常被用于脂質(zhì)體制備中，因?yàn)樗c膽固醇的組合效果好，形成脂質(zhì)體的韌性和穩(wěn)定性更好。而膽固醇是必須的輔助成分，它可使脂質(zhì)體抗溶解力增強(qiáng)，并且可以提高其透過細(xì)胞壁的能力。

4. 加入其他輔助物質(zhì)

在制備過程中，可以加入表面活性劑或其他分子，以增強(qiáng)脂質(zhì)體的性質(zhì)。如二十烷基磺酸鈉（SDS）、聚二甲基硅氧烷（PDMS）等，加入后可以使脂質(zhì)體的穩(wěn)定性大大提高。

5. 制備脂質(zhì)體

有多種方法可以制備脂質(zhì)體，其中兩種較為常見的方法如下。

（1）通過機(jī)械分散法制備脂質(zhì)體

這是常用的方法之一。首先需要將所選的磷脂分子和膽固醇混合在一起，并將其溶解到有機(jī)溶劑（如甲醇、氯仿等）中。隨后將混合物加入離心管中，將所需的其他輔助物質(zhì)一起加入。接著，使用超聲或高壓處理將液體分散成一個(gè)微小的泡泡——脂質(zhì)體。

（2）通過溶劑蒸發(fā)冷凝法制備脂質(zhì)體

這種方法與機(jī)械分散法略有不同。選擇適當(dāng)?shù)娜軇┱舭l(fā)冷凝劑將所選的磷脂和其他成分混合在一起，形成脂質(zhì)體。該方法的優(yōu)點(diǎn)在于無需使用超聲波或高壓力，操作比較簡(jiǎn)單，且制備效率較高。其中，常用的溶劑蒸發(fā)冷凝劑有乙酸乙酯/乙醇、氯仿/甲醇、N，N-二甲基乙酰胺（DMSO）/水等。

6. 脂質(zhì)體的應(yīng)用

制備好的脂質(zhì)體在藥物和基因傳遞等領(lǐng)域中具有廣泛應(yīng)用。為了達(dá)到最佳效果，脂質(zhì)體需要以適當(dāng)?shù)臐舛群陀猛居糜陬A(yù)定的細(xì)胞或生物體系中。例如，脂質(zhì)體和藥物的相互作用可以促進(jìn)藥物的運(yùn)輸和傳輸，提高藥物的生物利用度；而基因載體脂質(zhì)體可以在細(xì)胞內(nèi)部進(jìn)行基因轉(zhuǎn)移，從而實(shí)現(xiàn)相應(yīng)的基因治療。

脂質(zhì)體的制備方法有很多，但它們的基礎(chǔ)結(jié)構(gòu)和特性大致相同。在制備過程中，需要選取適當(dāng)?shù)牧字湍懝檀肌⒓尤肫渌o助物質(zhì)，并用適當(dāng)?shù)姆椒ㄖ苽渲|(zhì)體。在實(shí)際應(yīng)用中，需要根據(jù)脂質(zhì)體的特性和細(xì)胞的需要來選擇合適的方法和條件。