Treg cell induction after depletion of platelets Emfret貨號R300 in vivo

Abstract

摘要

血小板是許多細(xì)胞因子和趨化因子的豐富來源，包括轉(zhuǎn)化生長因子 β 1 （TGF-β1）。TGF-β1 是將常規(guī) CD4+ T （Tconv） 細(xì)胞轉(zhuǎn)化為表達(dá)轉(zhuǎn)錄因子 Foxp3 的誘導(dǎo)調(diào)節(jié)性 T （iTreg） 細(xì)胞所必需的。血小板內(nèi)容物是否會影響Treg細(xì)胞特性尚未得到探索。在這項(xiàng)研究中，我們發(fā)現(xiàn)含有 TGF-β1 的普通血小板裂解物 （pltLys） 有效地誘導(dǎo)了 Tconv 細(xì)胞中 Foxp3 的表達(dá)。普通 pltLys-iTreg 細(xì)胞的常見 Treg 細(xì)胞表面表型和體外抑制活性與純化 TGF-β1 （purTGFβ-iTreg） 細(xì)胞生成的 iTreg 細(xì)胞相似。然而，通過基因微陣列分析確定，pltLys-iTreg 和 purTGFβ-iTreg 細(xì)胞之間的基因表達(dá)存在顯著差異，尤其是在顆粒酶 B、干擾素 γ 和白細(xì)胞介素-2 中（分別相差 30.99 倍、29.18 倍和 17.94 倍）。根據(jù)這些基因特征，我們發(fā)現(xiàn)在重組人FVIII（rhF8）輸注后，與凝血因子VIII（FVIII）缺陷（F8null，血友病A模型）小鼠中的purTGFβ-iTreg細(xì)胞相比，pltLys-iTreg細(xì)胞改善了轉(zhuǎn)移后的細(xì)胞恢復(fù)和免疫抑制功能。在F8null小鼠中，急性抗體介導(dǎo)的血小板破壞，然后輸注rhF8，增加了Treg細(xì)胞的數(shù)量，并抑制了對rhF8的抗體反應(yīng)。與這些數(shù)據(jù)一致，當(dāng)用rhF8重新刺激時(shí)，來自血小板耗盡動(dòng)物的F8特異性Treg細(xì)胞的離體增殖增加。總之，我們的數(shù)據(jù)表明，pltLys-iTreg細(xì)胞可能在新興的臨床應(yīng)用中具有優(yōu)勢，并且血小板含量會影響TGF-β1誘導(dǎo)的iTreg細(xì)胞的性質(zhì)。

數(shù)據(jù)圖片：

原始論文：

1. TGF-β1 along with other platelet contents augments Treg cells to suppress anti-FVIII immune responses in hemophilia A mice.

背景介紹：

除了在止血中的基本作用外，血小板還調(diào)節(jié)先天性和適應(yīng)性免疫反應(yīng).1-6 其免疫調(diào)節(jié)活性的基礎(chǔ)機(jī)制尚不清楚。血小板分泌

顆粒含有多種介導(dǎo)生理和病理過程的生物活性蛋白.7,8 每天大約有 1011 個(gè)新產(chǎn)生的血小板進(jìn)入血液，取代那些老化或被破壞的

血小板。9-11 吞噬細(xì)胞清除凋亡血小板通過產(chǎn)生調(diào)節(jié)性細(xì)胞因子（包括轉(zhuǎn)化生長因子 β 1 （TGF-β1） 和白細(xì)胞介素-10

（IL-10））來產(chǎn)生免疫調(diào)節(jié)微環(huán)境，它們支持調(diào)節(jié)性 T （Treg） 細(xì)胞的發(fā)育和功能12-15。

在之前的研究中，我們證明了血小板中因子 VIII （FVIII） 或 FIX 的異位表達(dá)導(dǎo)致血小板 α 顆粒中 FVIII 或 FIX 的儲存，并誘導(dǎo)

血友病小鼠的抗原特異性免疫耐受.16-20 盡管介導(dǎo)血小板基因治療后免疫耐受的確切機(jī)制尚不清楚，但該過程可能是血小板內(nèi)

容物所固有的， 因?yàn)檠“濡令w粒也含有豐富的TGF-β1。事實(shí)上，TGF-β1在體內(nèi)的來源是血小板.21血小板來源的TGF-β1

（pltTGFβ）在支持免疫耐受方面的生理相關(guān)性尚不清楚，并且由于儲存在血小板顆粒中的其他豐富的細(xì)胞因子和趨化因子

而變得復(fù)雜5,22。

pltTGFβ、其他血小板內(nèi)容物和 Treg 細(xì)胞的特性之間可能存在重要聯(lián)系。我們假設(shè) pltTGFβ 可以誘導(dǎo)常規(guī) T （Tconv） 細(xì)胞成

為功能誘導(dǎo)調(diào)節(jié)性 T （iTreg） 細(xì)胞，并且血小板中的其他內(nèi)容會影響 pltTGFβ 誘導(dǎo)的 Treg 細(xì)胞的性質(zhì)。在這項(xiàng)研究中，我們

檢查了血小板裂解物 （pltLys） 在體外驅(qū)動(dòng) iTreg 細(xì)胞分化的能力。我們分析了 pltLys 產(chǎn)生的 iTreg 細(xì)胞的基因特征、Foxp3

表達(dá)的穩(wěn)定性和抑制功能。我們還研究了血小板和Treg細(xì)胞的體內(nèi)相關(guān)性以及它們在血友病A（FVIII缺陷，F(xiàn)8null）小鼠中對重

組FVIII（rhF8）輸注的反應(yīng)中的免疫抑制功能。我們的數(shù)據(jù)顯示，pltTGFβ與其他血小板內(nèi)容物一起在改變Treg細(xì)胞的基因表

達(dá)特征、促進(jìn)Treg細(xì)胞穩(wěn)定性和增強(qiáng)抗原特異性Treg細(xì)胞抑制功能方面發(fā)揮重要作用。